| 更新時(shí)間： | 2020-12-11 |
| 訪問量： | 1320 |
| 廠商性質(zhì)： | 生產(chǎn)廠家 |
豬偽狂犬 gE 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒*中垂詢！
豬偽狂犬 gE 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
英文名稱：ELISA Kit for detection of antibody against Pseudorabies virus gE glycoprotein
【規(guī)格】
96T×2/盒
【作用與用途】
測(cè)定豬血清中豬偽狂犬 gE 抗體，用于偽狂犬病毒gE 基因缺失疫苗免疫豬與自然感染豬的鑒別診斷
【自備器材】
1．酶標(biāo)儀，雙波長(zhǎng) 450/630nm 濾光片
2．精q的微量移液器（單道 1-100μl、0.5-10μl、多道 30-300μl）
3．水浴箱或恒溫箱
4．微量振蕩器
5．洗液吸移裝置
6．一次性槍頭（10μl，200μl）
7．去離子水
【主要組成成份】
1 | PRV-gE 抗原包被板 | 96T×2 |
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2 | 酶標(biāo)記物 | 22ml | 黃色帽 |
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3 | 樣本稀釋液 | 50ml | 透明帽 |
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4 | PRV-gE-IgG 陰性對(duì)照血清 | 1.5ml | 綠色帽 |
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5 | PRV-gE-IgG 陽(yáng)性對(duì)照血清 | 1.5ml | 紅色帽 |
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6 | 顯色劑 | 12ml*2 | 橙色帽 |
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7 | 終止液 | 12ml | 藍(lán)色帽 |
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8 | 20X 濃縮洗滌液 | 50ml | 白色帽 |
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9 | 蓋板膜 | 2 張 |
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10 | 說明書 | 1 份 |
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【樣本要求】
1．本試劑檢測(cè)的樣本為豬血清，樣本應(yīng)無菌采集，2℃～8℃貯存應(yīng)不超過一周，長(zhǎng)期應(yīng)在-20℃以下保存。
【實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備】
1．試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實(shí)驗(yàn)前，先取出置室溫 30min，可以獲得J結(jié)果。
2．樣本稀釋：用試劑盒提供的樣本稀釋液將樣本作 40 倍稀釋（即：5μl 血清加 195μl 樣品稀釋液），混合均勻。
3．陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照稀釋：用試劑盒提供的樣本稀釋液將陽(yáng)性對(duì)照血清和陰性對(duì)照血清作4倍稀釋（即：50μl血清加150μl樣本稀釋液），混合均勻。
4．配制洗滌液：將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去離子水稀釋 20 倍（即 1ml 濃縮洗滌液加 19ml 水），即可使用。注意：使用前要使結(jié)晶*溶解。
【檢驗(yàn)方法】
1．加樣：根據(jù)樣本數(shù)量，取所需板條，檢測(cè)時(shí)，設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照各 2 孔，分別加入稀釋后的陰、陽(yáng)性對(duì)照血清 100μl 于相應(yīng)孔中。其余為樣本孔，每孔加 100μl 用樣本稀釋液稀釋好的樣本（可做單孔也可雙孔檢驗(yàn)）。
2．溫育：加樣后，蓋上蓋板膜，置 37℃溫育 30 分鐘。
3．洗板：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿反
應(yīng)板孔，靜置 10 秒甩出，洗滌 3 次，后
一次洗滌后在吸水紙上拍干。
4．加酶：每孔加酶標(biāo)記物 100μl。
5．溫育：加好酶標(biāo)記物的反應(yīng)板蓋好蓋板
膜，置 37℃溫育 30 分鐘。
6．洗板：同步驟 3。
7．顯色：每孔加顯色劑 100μl，振蕩混勻，
37℃避光反應(yīng) 10 分鐘。
8．終止：每孔加終止液 50μl，振蕩 10 秒，
充分混勻，終止后即讀數(shù)。
9．讀數(shù)：以450nm/ 630nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)，讀取各孔吸光度值（OD 值）。
【結(jié)果判定】
在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔的 OD 值。檢測(cè)結(jié)果有效的條件是陽(yáng)性對(duì)照孔的平均 OD 值≥0.5，陰性對(duì)照孔的平均 OD 值必須＜0.1；樣品中抗體存在與否，或樣本中抗體的相對(duì)水平的高低由 S/P 值決定，S/P 值計(jì)算時(shí)按以下方式處理:
S/P=(樣本 OD450/630 值-NCx)/（PCx-NCx)，
其中 NCx表示陰性對(duì)照孔平均 OD450/630 值
（0.05 以下的數(shù)值按 0.05 計(jì)算）；PCx表示陽(yáng)性對(duì)照孔平均 OD450/630 值；
當(dāng)樣本的 S/P≥0. 25時(shí)判為陽(yáng)性；樣品 S/P 值＜0.25時(shí)判為陰性；
【注意事項(xiàng)】
1．本試劑盒僅供研究使用。
2．不要使用過期的試劑盒組分，不要把不同
批次的組分混合使用。
3．使用試劑盒之前，一定要仔細(xì)閱讀說明書。
4．使用前，濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫
（20～25℃），并搖動(dòng)使沉淀溶解（hao在
37℃水浴鍋中加熱5～10分鐘），然后用去離
子水作 20倍稀釋（例如：50ml的濃縮洗滌液
加上 950ml 蒸餾水），混勻，稀釋好的洗滌
液在 2～8℃可以存放 7-10 日。
5．本試劑盒應(yīng)按含有傳染性材料對(duì)待，試驗(yàn)廢棄物應(yīng)經(jīng) 121℃高壓蒸汽滅菌 30 分鐘，或5.0g/L 次氯酸鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
6．微孔板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)在室溫中平
衡至潮氣干盡后方可拆開，未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封 2℃-8℃保存。未用完的液體試劑應(yīng)蓋好瓶蓋，與其它配套組份放入試劑盒中于 2℃-8℃避光保存。
7．應(yīng)用微量移液器加入樣本及試劑，并經(jīng)常
校對(duì)其準(zhǔn)確性。
8．加洗滌液時(shí)應(yīng)做到滿而不溢，防止孔口有
游離酶不能洗凈或各孔間的交叉污染。
9．終止液有腐蝕性，若濺到皮膚或衣物上應(yīng)
立即用大量清水沖洗干凈。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
于2℃～8℃避光保存，防止冷凍，有期
12 個(gè)月。
【生產(chǎn)日期及批號(hào)】
詳見包裝袋和外包裝盒。
豬細(xì)小病毒抗體檢測(cè)試劑盒
豬乙型腦炎抗體檢測(cè)試劑盒
豬圓環(huán)病毒2型抗體診斷試劑盒
高致病性豬藍(lán)耳病病毒核酸熒光PCR檢測(cè)
克倫特羅(Clen)ELISA快速檢測(cè)試劑盒（檢尿樣/組織/飼料，靈敏度0.1ppb，一步法）
