更新時間: | 2023-10-26 |
訪問量: | 3942 |
廠商性質(zhì): | 生產(chǎn)廠家 |
提供商:上海研謹生物服務(wù)名稱:免疫共沉淀(Co-IP)實驗代做規(guī)格:實驗服務(wù)周期:2-5周 收費標(biāo)準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)
Co-IP:是一種利用抗原抗體相互作用的免疫學(xué)原理來研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典
實驗方法,它可以確定兩種蛋白在完整細胞內(nèi)生理條件下是否存在相互作用。
原理:
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其原理是:當(dāng)細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來。
優(yōu)點為:
(1)相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);
(2)蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的,可以避免人為的影響;
(3)可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。
缺點為:
(1)可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用;
(2)兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合,而可能有第三者在中間起橋梁作用;
(3)必須在實驗前預(yù)測目的蛋白是什么,以選擇后檢測的抗體,所以,若預(yù)測不正確,實驗就得不到結(jié)果,方法本身具有冒險性。
免疫共沉淀(Co-IP)實驗?步驟:
1.試劑準備,樣品收集
2.免疫沉淀反應(yīng)后,在進行電泳
3.通過免疫共沉淀確定結(jié)合蛋白
免疫共沉淀(Co-IP)實驗?結(jié)果展示:
實驗周期及交付標(biāo)準
1.實驗周期: 2-5周
2.交付標(biāo)準: WB顯色圖、原始膠片、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)
需確認的信息
1.樣本種屬及類型
2.目的蛋白及ID號
3.是否提供--抗
4.樣本數(shù)量及分組信息
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