人膽囊上皮細胞永生化+GFP
Immortalization of human gallbladder epithelial cells
貨號：YJ-004a（免疫熒光鑒定）
價格： 3200.0
規(guī)格： 5*10 5
細胞詳述
膽囊，是位于右方肋骨下肝臟后方的梨形囊袋構造，有濃縮和儲存膽汁之作用。膽囊壁由粘膜、肌層和外膜三層組成。
膽囊內面以粘膜覆蓋，有發(fā)達的皺襞。膽囊收縮排空時，皺襞高大而分支；膽囊充盈時，皺襞減少變矮。粘膜上皮為單層柱狀，內分散分部著少量杯狀細胞。膽囊粘膜細胞具有典型的吸收型細胞的特征，具有較強的吸收和濃縮功能，上皮細胞吸收膽汁中的水和無機鹽，經(jīng)細胞側面的質膜轉運至上皮細胞間隙內，吸收的水和無機鹽通過基膜進入固有層的血管和淋巴管內。同時，膽囊粘膜亦有分泌功能，分泌粘液。
該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶SV40基因。
細胞特性
1) 細胞來源于人膽囊組織。
2) 細胞鑒定：細胞角蛋白19（CK-19）免疫熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5) 細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養(yǎng)。
細胞篩選
該細胞為穩(wěn)定轉染GFP的細胞，隨細胞傳代次數(shù)的增加，其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度，可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。
建議收到細胞后至少傳3代，凍存留種后再進行篩選。
初次進行細胞篩選時，建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng)，若無細胞漂浮或者漂浮較少，即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選，以此類推，至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中，漂浮細胞大于60%，則停止篩選，換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng)，至細胞密度約80%，可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖，可停止篩選，用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。
產(chǎn)品的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1) 1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
產(chǎn)品使用
1) 本產(chǎn)品僅能用于科研
2) 本產(chǎn)品未通過直接用于活體動物和人的審核
3) 本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核
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