RNA純化試劑盒說明書
RNA Cleanup Kit
RNA純化試劑盒
Cat. No. K0589
保存:室溫
組分說明
Catalog no. K0589
Kit Size 20
Buffer RL 20 ml
Buffer RW2(concentrate) 11 ml
RNase-Free Water 10 ml
Spin Column RS 20
Collection Tube(1.5 ml) 20
Collection Tube(2 ml) 20
產品簡介
本試劑盒使用*的離心吸附柱,在高鹽條件下 RNA 與硅基質膜高效、專一地結合,適用于從酶促反應及其他多種方法提取的 RNA 溶液中進一步純化和濃縮 RNA,并將 RNA 樣品進行脫鹽處理,有效回收得到高純度的 RNA。該試劑盒最小可以將 RNA 樣品濃縮至 30-50 µl,回收得到的 RNA 可直接用于微點陣分析和 Real-time PCR 等敏感實驗。
注意事項
1. 預防RNase污染,應注意以下幾方面:
1)使用無RNase的塑料制品和槍頭,避免交叉污染。
2)玻璃器皿應在使用前于180℃高溫下干烤4小時,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分鐘,用水*沖洗后高壓滅菌。
3)配制溶液應使用無RNase的水。
4)操作人員戴一次性口罩和手套,實驗過程中要勤換手套。
2. 第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在 Buffer RW2 中加入無水乙醇。
3. Buffer RL 如果產生沉淀,請加熱使其溶解后放置。
4. 所有離心步驟均在室溫下進行,且所有操作步驟動作要迅速。
自備試劑:無水乙醇(新開封或提取RNA專用)
操作步驟
1. 用 RNA-Free Water 調整樣品至總體積至 100 μl,加入 350 μl Buffer RL,充分混勻。
2. 加入 250 μl 無水乙醇,混勻。
3. 將得到的溶液700 μl轉移到吸附柱(Spin Column RS)中(吸附柱已裝入收集管 2 ml Collection Tube 中),10,000rpm(~11,500 x g)離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
4. 向吸附柱中加入500 μl Buffer RW2(用前檢查已加入無水乙醇), 10,000 rpm 離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
5. 重復步驟4。
6. 將吸附柱放回收集管中,12,000 rpm離心1分鐘。
7. 將吸附柱裝入新的RNase-Free 1.5ml收集管中,向吸附膜的中間部位加入30-50 μl RNase-Free Water,室溫放置1分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。
注意: RNase-Free Water最好在70℃預熱,確保RNA洗脫充分;洗脫體積不應小于30 μl,體積過小影響回收率。
從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗外包及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。
實驗代做服務:
| |||
|
| ||
| |||
|